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【海能實(shí)驗(yàn)室】膳食纖維測(cè)定儀測(cè)定可溶性、不可溶性及總膳食纖維含量
在追求健康生活的今天，大豆及豆制品
因其豐富的營養(yǎng)價(jià)值和多樣的烹飪方式
逐漸成為人們的選擇。
大豆膳食纖維粉
是一種常見的食品原料，
含有豐富的
可溶性和不可溶性膳食纖維，
還含有豐富的氨基酸和少量植物脂肪。
測(cè)定大豆膳食纖維粉的膳食纖維含量
對(duì)于其質(zhì)量把控、食效分類
具有重要意義。
本方案使用DF06膳食纖維測(cè)定儀
對(duì)大豆膳食纖維粉進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)方案
儀器
DF06膳食纖維測(cè)定儀
K1100全自動(dòng)凱氏定氮儀
馬弗爐
分析天平
……
儀器準(zhǔn)備
1、將濾膜編號(hào)，于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MG后，安裝于過濾漏斗中，并安裝至儀器相應(yīng)位置處。
2、移取350 μLl的熱穩(wěn)定淀粉酶溶液，溶于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中；移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液，溶于盛有47 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中；移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液，溶解于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中，然后將酶瓶安裝至儀器相應(yīng)位置處。
3、將酶解袋裝于儀器相應(yīng)位置處。
4、確保95%乙醇、純水、順丁烯二酸緩沖液、醋酸溶液的對(duì)應(yīng)試劑桶中試劑充足，然后將其與對(duì)應(yīng)接頭連接。
樣品制備
本方案采用SOX606索氏提取儀進(jìn)行樣品的脫脂處理。
精確稱取混勻后的樣品10~12 g（精確至0.1 mg）左右，記為MC。將稱好的樣品轉(zhuǎn)移至濾紙筒中。將盛有樣品的濾紙筒置于儀器萃取室內(nèi)，向溶劑杯中加入沸程30~60℃的石油醚，儀器參數(shù)設(shè)置如下：
抽提完成后，將殘?jiān)娓芍梁阒?，記為mD。
總膳食纖維測(cè)定
1、設(shè)定酶解程序如下：
2、在運(yùn)行-第一法中選定設(shè)定酶解程序，開始運(yùn)行，并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對(duì)應(yīng)位置處，然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中。（注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知，否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋，沖洗體積不超過兩毫升）。
3、儀器自動(dòng)進(jìn)行酶解、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測(cè)定（或需添加1 mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整）空白、樣品的pH值為4.3±0.2，然后點(diǎn)擊下一步。若需測(cè)定不可沉降性膳食纖維（SDFS），則需按照提示加入內(nèi)標(biāo)物，以進(jìn)行后續(xù)的液相法測(cè)試。
4、儀器自動(dòng)進(jìn)行沉淀、抽濾，得到濾液與TDF的殘?jiān)?，將附有殘?jiān)臑V紙取出，按照十字折疊后放置于樣品架上，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時(shí)）并稱重為MGR。
5、每?jī)煞輾堅(jiān)?，一份按照國?biāo)《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》第一法進(jìn)行消解（推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g、硫酸20 mL，420℃下保溫時(shí)間至少為3小時(shí)），蒸餾、滴定，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP；另一份置于馬弗爐中，于550℃下灰化3h測(cè)定灰分，計(jì)算灰分質(zhì)量MA。
不可溶性膳食纖維及可溶性膳食纖維測(cè)定
1、設(shè)定酶解程序如下：
2、在運(yùn)行-第一法中選定設(shè)定酶解程序，開始運(yùn)行，并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對(duì)應(yīng)位置處，然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中。（注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知，否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋，沖洗體積不超過兩毫升）。
3、儀器自動(dòng)進(jìn)行酶解、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測(cè)定（或需添加1mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整）空白、樣品的pH值為4.3±0.2，然后點(diǎn)擊下一步。若需測(cè)定不可沉降性膳食纖維（SDFS），則需按照提示加入內(nèi)標(biāo)物，以進(jìn)行后續(xù)的液相法測(cè)試。
4、儀器自動(dòng)進(jìn)行抽濾，得到濾液與ISDF的殘?jiān)?，將附有殘?jiān)臑V紙取出，按照十字折疊后放置于樣品架上，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時(shí)）并稱重為MGR。
5、將過濾漏斗的外斗裝回儀器對(duì)應(yīng)位置，點(diǎn)擊下一步，儀器自動(dòng)加入95%乙醇進(jìn)行沉淀。
6、沉淀完成后，在儀器上換裝另一套裝有恒重好的濾膜的漏斗及燒瓶，將沉淀好的溶液搖勻并倒入新的漏斗中抽濾。抽濾完成后，按照十字折疊后放置于樣品架上，在105℃烘箱中烘干至恒重（至少需4小時(shí)）并稱重為MGR。
7、每?jī)煞輾堅(jiān)?，一份按照國?biāo)《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》第一法進(jìn)行消解（推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g、硫酸20 mL，420℃下保溫時(shí)間至少為3小時(shí)），蒸餾、滴定，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP；另一份置于馬弗爐中，于550℃下灰化3h測(cè)定灰分，計(jì)算灰分質(zhì)量MA。
結(jié)果、討論與注意事項(xiàng)
1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)選取的大豆膳食纖維粉樣品經(jīng)酶解、抽濾、烘干恒重、測(cè)定蛋白和灰分后，得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示，其中不可溶性膳食纖維（ISDF）的結(jié)果如下：
可溶性膳食纖維（SDF）含量如下表：
總膳食纖維（TDF）為ISDF與SDF的加和，測(cè)得該大豆膳食纖維粉的總膳食纖維含量為71.090%。
3、注意事項(xiàng)
大豆膳食纖維粉可部分殘留于稱量紙上，必要時(shí)可用不超過2 mL緩沖溶液沖洗，洗液一并轉(zhuǎn)移至酶解袋中。
隨著人們?cè)絹碓阶⒅仫嬍辰】?，更多人關(guān)注到膳食纖維這一指標(biāo)。根據(jù)《中國居民膳食指南》要求，每日需攝入25-30g 膳食纖維，在日常選購商品時(shí)，大家也可關(guān)注“增加膳食纖維”等標(biāo)注。
自動(dòng)膳食纖維測(cè)定儀可一鍵化完成酶解、沉降、洗滌等過程，以自動(dòng)化操作替代繁瑣人工，有效提高實(shí)驗(yàn)效率。DF06膳食纖維測(cè)定儀高效自動(dòng)、精準(zhǔn)可靠、簡(jiǎn)便友好、安全合規(guī)，主要應(yīng)用于食品中總膳食纖維、可溶性膳食纖維和不溶性膳食纖維等指標(biāo)的檢測(cè)。