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【海能實(shí)驗(yàn)室】膳食纖維測(cè)定儀測(cè)定可溶性、不可溶性及總膳食纖維含量

點(diǎn)擊次數(shù):763 更新時(shí)間:2024-05-27

在追求健康生活的今天,大豆及豆制品

因其豐富的營養(yǎng)價(jià)值和多樣的烹飪方式

逐漸成為人們的選擇。

 

大豆膳食纖維粉

是一種常見的食品原料,

含有豐富的

可溶性和不可溶性膳食纖維,

還含有豐富的氨基酸和少量植物脂肪。

 

測(cè)定大豆膳食纖維粉的膳食纖維含量

對(duì)于其質(zhì)量把控、食效分類

具有重要意義。

 

本方案使用DF06膳食纖維測(cè)定儀

對(duì)大豆膳食纖維粉進(jìn)行測(cè)定。

 

實(shí)驗(yàn)方案

儀器

 

DF06膳食纖維測(cè)定儀

K1100全自動(dòng)凱氏定氮儀

馬弗爐

分析天平

……

 

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儀器準(zhǔn)備

 

1、將濾膜編號(hào),于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為MG后,安裝于過濾漏斗中,并安裝至儀器相應(yīng)位置處。

 

2、移取350 μLl的熱穩(wěn)定淀粉酶溶液,溶于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中;移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液,溶于盛有47 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中;移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液,溶解于盛有50 mL的順丁烯二酸緩沖液的酶瓶中,然后將酶瓶安裝至儀器相應(yīng)位置處。

 

3、將酶解袋裝于儀器相應(yīng)位置處。

 

4、確保95%乙醇、純水、順丁烯二酸緩沖液、醋酸溶液的對(duì)應(yīng)試劑桶中試劑充足,然后將其與對(duì)應(yīng)接頭連接。

 

樣品制備

 

本方案采用SOX606索氏提取儀進(jìn)行樣品的脫脂處理。

 

精確稱取混勻后的樣品10~12 g(精確至0.1 mg)左右,記為MC。將稱好的樣品轉(zhuǎn)移至濾紙筒中。將盛有樣品的濾紙筒置于儀器萃取室內(nèi),向溶劑杯中加入沸程30~60℃的石油醚,儀器參數(shù)設(shè)置如下:

 

image.png

 

抽提完成后,將殘?jiān)娓芍梁阒?,記為mD。

 

總膳食纖維測(cè)定


1、設(shè)定酶解程序如下:

 

image.png

 

2、在運(yùn)行-第一法中選定設(shè)定酶解程序,開始運(yùn)行,并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對(duì)應(yīng)位置處,然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中。(注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知,否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋,沖洗體積不超過兩毫升)。

 

3、儀器自動(dòng)進(jìn)行酶解、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測(cè)定(或需添加1 mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整)空白、樣品的pH值為4.3±0.2,然后點(diǎn)擊下一步。若需測(cè)定不可沉降性膳食纖維(SDFS),則需按照提示加入內(nèi)標(biāo)物,以進(jìn)行后續(xù)的液相法測(cè)試。

 

4、儀器自動(dòng)進(jìn)行沉淀、抽濾,得到濾液與TDF的殘?jiān)?,將附有殘?jiān)臑V紙取出,按照十字折疊后放置于樣品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小時(shí))并稱重為MGR

 

5、每?jī)煞輾堅(jiān)?,一份按照國?biāo)《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》第一法進(jìn)行消解(推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g、硫酸20 mL,420℃下保溫時(shí)間至少為3小時(shí)),蒸餾、滴定,計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP;另一份置于馬弗爐中,于550℃下灰化3h測(cè)定灰分,計(jì)算灰分質(zhì)量MA。

 

不可溶性膳食纖維及可溶性膳食纖維測(cè)定

 

1、設(shè)定酶解程序如下:

 

image.png


2、在運(yùn)行-第一法中選定設(shè)定酶解程序,開始運(yùn)行,并按照步驟將酶解袋安裝至儀器對(duì)應(yīng)位置處,然后按照步驟提示將樣品倒入酶解袋中。(注意避免樣品粘在酶解袋內(nèi)壁高于上壓條的未知,否則應(yīng)用帶針頭的注射器吸取緩沖液將樣品沖入酶解袋,沖洗體積不超過兩毫升)。


3、儀器自動(dòng)進(jìn)行酶解、乙酸溶液添加。然后根據(jù)彈窗提示測(cè)定(或需添加1mol/L氫氧化鈉溶液或乙酸溶液調(diào)整)空白、樣品的pH值為4.3±0.2,然后點(diǎn)擊下一步。若需測(cè)定不可沉降性膳食纖維(SDFS),則需按照提示加入內(nèi)標(biāo)物,以進(jìn)行后續(xù)的液相法測(cè)試。


4、儀器自動(dòng)進(jìn)行抽濾,得到濾液與ISDF的殘?jiān)?,將附有殘?jiān)臑V紙取出,按照十字折疊后放置于樣品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小時(shí))并稱重為MGR。


5、將過濾漏斗的外斗裝回儀器對(duì)應(yīng)位置,點(diǎn)擊下一步,儀器自動(dòng)加入95%乙醇進(jìn)行沉淀。


6、沉淀完成后,在儀器上換裝另一套裝有恒重好的濾膜的漏斗及燒瓶,將沉淀好的溶液搖勻并倒入新的漏斗中抽濾。抽濾完成后,按照十字折疊后放置于樣品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小時(shí))并稱重為MGR。


7、每?jī)煞輾堅(jiān)?,一份按照國?biāo)《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》第一法進(jìn)行消解(推薦試劑量為硫酸銅0.2 g、硫酸鉀3 g、硫酸20 mL,420℃下保溫時(shí)間至少為3小時(shí)),蒸餾、滴定,計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量MP;另一份置于馬弗爐中,于550℃下灰化3h測(cè)定灰分,計(jì)算灰分質(zhì)量MA。

 

 

結(jié)果、討論與注意事項(xiàng)

 

1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

實(shí)驗(yàn)選取的大豆膳食纖維粉樣品經(jīng)酶解、抽濾、烘干恒重、測(cè)定蛋白和灰分后,得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示,其中不可溶性膳食纖維(ISDF)的結(jié)果如下:

 

 

image.png

 

可溶性膳食纖維(SDF)含量如下表:

 

image.png

 

 

 

 

2、討論

 

總膳食纖維(TDF)為ISDF與SDF的加和,測(cè)得該大豆膳食纖維粉的總膳食纖維含量為71.090%。

 

3、注意事項(xiàng)

 

大豆膳食纖維粉可部分殘留于稱量紙上,必要時(shí)可用不超過2 mL緩沖溶液沖洗,洗液一并轉(zhuǎn)移至酶解袋中。

 

 

 

隨著人們?cè)絹碓阶⒅仫嬍辰】?,更多人關(guān)注到膳食纖維這一指標(biāo)。根據(jù)《中國居民膳食指南》要求,每日需攝入25-30g 膳食纖維,在日常選購商品時(shí),大家也可關(guān)注“增加膳食纖維”等標(biāo)注。

 

自動(dòng)膳食纖維測(cè)定儀可一鍵化完成酶解、沉降、洗滌等過程,以自動(dòng)化操作替代繁瑣人工,有效提高實(shí)驗(yàn)效率。DF06膳食纖維測(cè)定儀高效自動(dòng)、精準(zhǔn)可靠、簡(jiǎn)便友好、安全合規(guī),主要應(yīng)用于食品中總膳食纖維、可溶性膳食纖維和不溶性膳食纖維等指標(biāo)的檢測(cè)。

 

 

 

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